Принцип метода: если при наслаивании мочи на азотную кислоту на границе двух жидкостей образуется тонкое белое кольцо между 2-й и 3-й минутами, то в исследуемой моче содержится 0,033 %о белка. Реактивы: концентрированная азотная кислота. Ход исследования: В пробирку наливают 1–3 мл азотной кислоты и осторожно по стенке наслаивают такое же количество мочи. Замечают время после наслаивания. Если кольцо на границе жидкостей (рассматривать его следует на черном фоне) образуется сразу или раньше 2 минут после наслаивания, мочу необходимо развести водой. После этого производят повторное определение белка в разведенной моче. Разведение производят до тех пор, пока белое кольцо при наслаивании на азотную кислоту разведенной мочи не появится между 2-й и 3-й минутами. Количество белка вычисляют путем умножения 0,033 %о на степень разведения. Определение сахара (глюкозы) Моча здорового человека содержит минимальное количество глюкозы – 0,03—0,20 г/л. Обычными качественными пробами оно не обнаруживается. Появление глюкозы в моче называется глюкозурией. Причины глюкозурии: ➠ сахарный диабет; ➠ тиреотоксикоз; ➠ заболевание почек (нефроз, нефрит, нефротический синдром, ренальный диабет); ➠ цирроз печени. Физиологическая глюкозурия наблюдается при употреблении больших количеств сладостей, после стресса, приема лекарств (кофеин, кортикостероидные гормоны). Для более достоверной оценки исследуют мочу, собранную за сутки. Качественная проба (проба Гайнеса) Проба основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет). Реактивы: реактив Гайнеса (смесь растворов сернокислой меди, едкого натра и глицерина). Ход исследования: В пробирку наливают 3–4 мл раствора Гайнеса, прибавляют 8—10 капель мочи и нагревают до кипения. При наличии сахара цвет мочи изменяется от коричневато-зеленого до красного, в зависимости от количества сахара. В норме сахара в моче нет. Количественное определение сахара в моче поляриметрическим методом Принцип метода заключается в использовании свойства глюкозы вращать плоскость поляризации вправо. По углу вращения поляризованного луча можно определить количество глюкозы. Моча должна быть прозрачной, не содержать белка, кислой реакции. Для этого мочу подкисляют слабой уксусной кислотой, кипятят, охлаждают и фильтруют. Трубку поляриметра заполняют профильтрованной мочой без пузырьков воздуха, накрывают шлифованным стеклом, плотно завинчивают, насухо вытирают и помещают в аппарат. Определение производят спустя 2–3 минуты после заполнения трубки, так как колебание частиц жидкости мешает исследованию. Оптически активный раствор глюкозы, отклоняя луч, меняет интенсивность света в окуляре; восстановить освещенность можно, повернув анализатор на определенный угол. Угол отклонения выражается в градусах шкалы прибора. Угол отклонения в 1 градус соответствует 1 % глюкозы при длине трубки 18,94; если длина 9,47 – полученный результат следует умножить на 2. Определение ацетоновых тел (проба Ланге) К ацетоновым телам относятся ацетон, ацетоноуксусная кислота и оксимасляная кислота. В моче встречаются совместно, поэтому раздельное их определение клинического значения не имеет. В норме в моче не содержатся, их чаще всего наблюдают при тяжелом сахарном диабете, диабетической коме, голодании, тяжелых токсикозах. Реактивы: ➠ смесь нитропрусидного натрия с сернокислым аммонием; ➠ раствор аммиака. В пробирку насыпают немного, так чтобы было покрыто дно, нитропрусидной смеси, и приливают 5 мл мочи, взбалтывают и осторожно наслаивают 2 мл аммиака. Фиолетово-красное кольцо, появившееся на границе двух жидкостей, свидетельствует о наличии в моче ацетона. Определение билирубина Билирубин в моче здоровых людей не определяется. При заболеваниях печени он появляется в моче в виде билирубина глюкуронида (прямой билирубин). Причиной могут быть паренхиматозные желтухи. Бывает также при вирусных гепатитах или нарушении оттока желчи при механических желтухах, а вот для гемолитических желтух билирубинурия не характерна, поскольку гемобилирубин (непрямой билирубин) не проходит через почечный фильтр. Проба Розина Качественная реакция основана на превращении билирубина под воздействием окислителей (йода) в биливердин зеленого цвета. Реактивы: раствор Люголя или 1 %-ный спиртовой раствор йода. На 3–4 мл мочи осторожно наслаивают 1–2 мл 1 %-ного спиртового раствора йода или раствора Люголя. При наличии желчных пигментов билирубина на границе жидкостей появляется зеленое кольцо.